Vertimas CAR-T: In vitro ekspertizė ir NHP studijų palaikymas – „Prisys Biotech“

Chimerinių antigenų receptorių T-ląstelių (CAR-T) terapija pakeitė tam tikrų piktybinių hematologinių navikų gydymo paradigmas ir yra aktyviai tiriama dėl solidinių navikų. Nepaisant klinikinės sėkmės, vertimas iš suolo į lovą išlieka sudėtingas. Su imunitetu susiję nepageidaujami reiškiniai, pvz., citokinų išsiskyrimo sindromas (CRS) ir su imuninėmis efektorinėmis ląstelėmis susijęs neurotoksiškumo sindromas (ICANS), yra pagrindiniai saugumo aspektai klinikinio vystymosi metu, todėl ikiklinikiniu požiūriu sunku numatyti jų dažnį ir sunkumą.

Tradiciniai graužikų modeliai-ypač imuninės{1}}pelių ksenografai, kuriems trūksta imuninės sistemos,-yra būtini norint pradėti -sąvokos ir mechanizmų tyrimus, tačiau modeliuojant žmogaus sisteminį imuninį atsaką yra gerai{5}}atpažįstami apribojimai.Ne{0}}žmoginiai primatai (NHP), dėl glaudesnės imunologinės homologijos su žmonėmis, teikia papildomos informacijos apie saugumą, biologinį pasiskirstymą ir kai kuriuos imuninės dinamikos aspektus, kuriuos sunku užfiksuoti graužikams.

Vertimo komandoms, vertinančioms CAR-T kandidatus, NHP tyrimai gali būti naudingi keliose konkrečiose srityse:

1. Patobulintas saugos signalo aptikimas (CRS ir neurotoksiškumo modeliavimas)
Graužikų sistemos dažnai nesugeba atkurti sisteminių citokinų kaskadų, pastebėtų esant sunkioms CRS arba sudėtingoms ICANS neurologinėms pasekmėms. Sergant NHP, serijinis citokinų (pvz., IL-6, IFN-, TNF-) mėginių ėmimas kartu su standartizuotais elgesio ir neurologiniais vertinimais leidžia kliniškai reikšmingiau įvertinti ūminį sisteminį imuninės sistemos aktyvavimą ir jo laiko profilį.

2. Įjungti-tikslinį / išjungti-naviko rizikos įvertinimą
Daugelis CAR taikinių turi žemą{0}}raiškos lygį normaliuose audiniuose. Didelė aminorūgščių sekos homologija tarp žmogaus ir NHP baltymų daugeliui antigenų leidžia realiau atlikti kryžminio -reaktyvumo tyrimus, padedančius anksti nustatyti galimą -tikslinį, ne{5}}toksiškumą navikams, kurie nėra akivaizdūs graužikų modeliuose.

3. Ląstelių terapijos PK/PD įžvalga
Pagrindinės CAR{0}}T-plėtros kinetikos, patvarumo, fenotipinės evoliucijos ir prekybos- farmakodinaminės savybės priklauso nuo sąveikos su nepažeistu adaptyviu imuniniu skyriumi. NHP yra imuninis-kompetentingas kontekstas, skirtas šios dinamikos profiliavimui išilgai, o tai gali padėti renkantis klinikinę dozę ir mėginių ėmimo strategijas.

Tinkamas aiškinimas ir apribojimai

NHP eksperimentai nėra tobulas žmonių rezultatų pakaitalas. Svarbūs apribojimai yra specifiniai rūšiai{1}}receptorių ekspresijos skirtumai, imuninis reguliavimas ir praktiniai auglių modeliavimo NHP apribojimai (pavyzdžiui, žmogaus navikų įsodinimas į NHP paprastai neįmanomas). Todėl NHP duomenys turėtų būti integruoti su patikimu in vitro funkciniu apibūdinimu, graužikų veiksmingumo modeliais ir transliaciniais biologiniais žymenimis, kad būtų sukurtas -įrodymų-svarumo metodas, skirtas pirmajam-su{6}}su žmonėmis.

„Prisys Biotech“ siūlo ikiklinikinių paslaugų rinkinį, skirtą sustiprinti pasitikėjimą vertimu, kartu išlaikant griežtus gerovės ir duomenų{0}kokybės standartus. Siekdami užtikrinti mokslinį skaidrumą, paaiškiname savo faktinę patirtį ir apimtį:

Patirties pareiškimas (tikslus atspindys):
„Prisys“ įdiegė savo galimybesin vitroCAR-T apibūdinimas, įskaitant citotoksiškumo tyrimus, citokinų multiplekso profiliavimą, tėkmės citometrija{1}}pagrįstą fenotipų nustatymą ir funkcinius T-ląstelių tyrimus. Iki šiol neatlikome autologinių ar alogeninių CAR-T infuzijų į NHP. Tačiau mūsų in vitro platforma ir imunologijos patirtis patvirtina mūsų gebėjimą kurti ir įgyvendinti integruotas ikiklinikines strategijas, kurios sujungia in vitro atradimus ir in vivo vertinimą, atliekamą bendradarbiaujant su atitinkamais partneriais ar rėmėjais.

Ką galime pateikti tiesiogiai:

• Tinkinti in vitro tyrimų rinkiniai, skirti CAR-T funkcinei charakteristikai (žudymo tyrimai, serijinis pakartotinis{1}}iššūkis, išsekimo žymenys, citokinų išsiskyrimo skydeliai).
• Didelio-turinio srauto citometrijos skydelio dizainas ir CAR išraiškos, diferenciacijos / išnaudojimo žymenų, proliferacijos ir aktyvinimo fenotipų patvirtinimas.
• Daugkartinis citokinų / chemokinų profiliavimas su laiko{0}}kurso analize, siekiant apibrėžti išsiskyrimo kinetiką kontroliuojamomis stimuliavimo sąlygomis.
• In vitro kryžminio -reaktyvumo tyrimas su atitinkamomis NHP pirminėmis ląstelėmis arba ląstelių linijomis, jei įmanoma, siekiant palaikyti tikslinę išraišką ir ne{1}}tikslinės rizikos įvertinimą.

Kaip palaikome in vivo programas (bendradarbiavimo modelis):

• Transliacinis tyrimo planas: konsultuojame dėl NHP tyrimo baigčių, mėginių ėmimo tvarkaraščių, biologinių žymenų parinkimo ir humaniško stebėjimo planų, pagrįstų in vitro duomenimis.
• Tyrimo perkėlimas ir GLP{0}}suderinamas ataskaitų teikimas: rengiame tyrimo SOP, analitinius planus ir duomenų paketus, tinkamus pateikti pagal reglamentus.
• Partnerių koordinavimas: kai reikalingi in vivo NHP tyrimai, Prisys gali derinti sukvalifikuotų NHP įrenginiųarba rėmėjas-paskirtas vivarijas, kad būtų galima atlikti tyrimus ir užtikrinti tęstinumą tarp apibūdinimo in vitro ir in vivo biologinių žymenų mėginių ėmimo / tyrimų.

Kuriant ikiklinikines CAR-T programas, skirtas klinikiniam vertimui informuoti, rekomenduojame integruoti šiuos elementus:

• Ikiklinikinis limfodepleto modeliavimas, kai tai moksliškai pagrįsta, kruopščiai įvertinant dozę{0}}poveikį ir pagrįstą medžiagų (pvz., ciklofosfamido, fludarabino) transliaciją ir laiką, palyginti su ląstelių infuzija.
• Standartizuoti, perspektyviai apibrėžti saugos galutiniai taškai (rūšims pritaikyti klasifikuoti CRS / ICANS metrikai), derinami su iš anksto nustatytomis citokinų / biožymenų grupėmis ir neurologiniais / elgsenos stebėjimo grafikais.
• Serijinis periferinio kraujo stebėjimas CAR transgenų kinetikai (qPCR arba skaitmeninis PGR), imunofenotipų nustatymui ir citokinų profiliavimui, siekiant apibūdinti plėtimosi{0}}patvarumo ryšius.
• Audinių biologinio pasiskirstymo mėginių ėmimas (jei tai tinkama etikos ir logistikos požiūriu), siekiant įvertinti organų poveikį ir galimą ne{0}}tikslinę lokalizaciją.

Veiksmingam CAR-T kandidatų transliaciniam įvertinimui reikalingas daugiasluoksnis metodas, suderinantis griežtą in vitro apibūdinimą su strategiškai suplanuotais in vivo tyrimais. „Prisys Biotech“ prisideda prie gilios imunologijos ir tyrimų patirties iš mūsų in vitro CAR-T darbo ir remia rėmėjus kurdama transliacinių tyrimų sistemas ir prireikus koordinuodama su in vivo partneriais. Mūsų tikslas yra generuoti duomenis, kurie reikšmingai rizikuoja-pirmiausia-žmonių planuose, išlaikant aukštus gyvūnų gerovės standartus ir duomenų vientisumą.