MRT{0}}Nurodomas AAV pristatymas naudojant NHP smegenų modelius, skirtus CNS genų terapijai

Centrinės nervų sistemos genų terapija išlieka techniškai sudėtinga, nes terapiniai agentai turi įveikti kraujo{0}}smegenų barjerą, pasiekti tikslius anatominius tikslus ir pasiekti kontroliuojamą pasiskirstymą sudėtingose ​​nervų grandinėse. Taikant AAV-pagrįstą terapiją, norint pagerinti regioninį specifiškumą ir sumažinti sisteminį poveikį, dažnai reikalingas vietinis intraparenchiminis įvedimas.

Salegio ir kt. apžvalgos straipsnis „Advanced Drug Delivery Reviews 2012 m.; 64(7):598–604, DOI: 10.1016/j.addr.2010,510 summarizes how510 summarizes how.MRT{0}}konvekcija{1}}patobulintas pristatymas, stereotaktinis taikymas ir refliuksui{0}}atspari kaniulė gali pagerinti AAV vektoriaus administravimą primatų smegenyse. Straipsnis ypač aktualus biofarmacijos įmonėms, kuriančioms CNS genų terapiją, kuriai reikalingi patikimi ne-žmogaus primatų transliacijos duomenys.

Straipsnyje aprašoma NHP CNS pristatymo platforma naudojant AAV vektorius, ypač AAV2, administruojamus perkonvekcija{0}}patobulintas pristatymas. CED taiko slėgio gradientą nuo kaniulės galiuko, kad paskirstytų makromolekules per smegenų intersticines erdves, todėl audiniai aprėpti plačiau nei vien difuzija.

Pagrindinis metodologinis pažanga buvo AAV2 infuzija kartu su Gadoteridol, MRT{2}}matomu atsekamuoju. Autoriai pranešė, kad MRT signalo pasiskirstymas realiuoju laiku koreliavo su vėlesne transgeno ekspresija NHP smegenyse, o tai palaiko gadoteridolį kaip pakaitinį vektorių pasiskirstymo žymeklį infuzijos metu.

Peržiūrėtoje platformoje taip pat buvo integruotas kaukolėje{0}}montuojamas nukreipimo įtaisas, MRT{1}}pagrįsta planavimo programinė įranga ir refliuksui-atspari CED kaniulė. Atliekant NHP patvirtinimo tyrimus, sistema palaikė patekimą į uodegą, putameną, talamusą, juodąją medžiagą, subtalaminį branduolį ir hipokampą, o kaniulės galiuko padėtis buvo pranešta per .<1 mm of the visually identified target site.

Straipsnyje pabrėžiami keli galutiniai taškai, kurie labai svarbūs NHP ikiklinikiniams CNS tyrimams.

Pirma, anatominis taikymo tikslumas yra labai svarbus, nes dėl mažų išdėstymo klaidų gali atsirasti nutekėjimas, ne{0}}tikslinis pasiskirstymas arba nepilnas audinių padengimas. Putamen kaniulės išdėstymas 3 mm ar mažesniu atstumu nuo tam tikrų gretimų struktūrų buvo susijęs su prastesniu izoliavimu, o optimizuotos įdėjimo zonos pagerino tikslinį-paskirstymą.

Antra, MRT stebėjimas realiuoju laiku leidžia tyrėjams stebėti infuzijos pasiskirstymą procedūros metu, o ne pasikliauti tik pomirtine analize. Tai gali padėti anksti nustatyti refliuksą, skilvelių nutekėjimą ir nepakankamą aprėptį.

Trečia, infuzijos greitis yra svarbus procedūrinis kintamasis. Ankstyvieji CED{1}}pagrįsti genų terapijos tyrimai naudojo infuzijos greitį ​<1 μL/min and relatively small infusion volumes of 50 μL because visual feedback was unavailable. Later work showed that reflux-resistant cannulae tolerated infusion rates up to 5 μL/min, while significant reflux was observed at 8 μL/min.

Viena svarbi išvada yra taMRT{0}}vadinamas CEDgali teikti grįžtamąjį{0}}operacinį grįžtamąjį ryšį AAV infuzijos metu, pagerinant procedūrų kontrolę ir sumažinant neapibrėžtumą atliekant CNS pristatymo tyrimus.

Straipsnyje taip pat aprašomas talaminis pristatymas kaip platesnės žievės transgeno ekspresijos strategija. Talamuose yra 50–60 branduolių, o viename NHP pavyzdyje 300 μL AAV2-hGDNF / atsekamosios medžiagos buvo infuzuota į kairįjį ir dešinįjį talamą, nepranešant apie nutekėjimą, refliuksą ar neigiamą elgesio poveikį. Vėliau buvo pastebėtas platus talaminis pasiskirstymas ir tvirta žievės transgeno ekspresija.

Kalbant apie bazinių ganglijų pristatymą, autoriai pabrėžia, kad AAV2-GDNF pernešimas dažniausiai yra anterogradinis, o ne retrogradinis. Tai palaiko tam tikrų Parkinsono ligos genų terapijos strategijų įvedimą į striatalą, o ne į nigralį ir pabrėžia, kad svarbu pasirinkti pristatymo tikslus pagal nervų grandinę, o ne tik į chirurginį prieinamumą.

Nors šioje apžvalgoje pateikiamos vertingos gairės, kuriant šiuolaikinius vaistus reikėtų atsižvelgti į keletą apribojimų. Pirma, tai apžvalginis straipsnis, o ne vienas kontroliuojamas veiksmingumo tyrimas, todėl jo išvados geriausiai tinka tyrimo planui, o ne tiesioginiams veiksmingumo etalonams. Antra, straipsnyje daugiausia dėmesio skiriama AAV2, o dabartiniuose CNS vamzdynuose dažnai naudojami inžineriniai kapsidai, alternatyvūs serotipai ir modifikuotos ekspresijos sistemos. Kiekvienas vektorius gali skirtis tropizmu, ekspresijos kinetika, biologiniu pasiskirstymu ir imuniniu profiliu.

Be to, MRT{0}}matomas pėdsakų pasiskirstymas išlieka pakaitinis rodmuo. Siekiant patikimo transliacinio aiškinimo, rėmėjai turėtų derinti vaizdavimą su vektoriaus genomo biologiniu pasiskirstymu, transgeno ekspresija, histopatologija, neuroelgesio stebėjimu ir farmakodinaminiais galutiniais taškais.

Prisys Biotech, mūsųNHP CNS farmakologijos platformapalaiko tinkintą ne{0}}žmogaus primatų CNS pristatymo tyrimo projektą ir integruotą MRT{1}}pagrįstą anatominį vertinimą su transliacinio efektyvumo galutiniais taškais. Šios galimybės padeda rėmėjams susieti pristatymo tikslumą su biologiniais rezultatais, įskaitant vektorių biologinį pasiskirstymą, tikslinį įsitraukimą, elgsenos pokyčius ir saugos stebėjimus.

Šis straipsnis sustiprina pagrindinį CNS genų terapijos principą: pristatymo strategija yra terapinio produkto strategijos dalis. Vektorinis dizainas, anatominio taikinio parinkimas, kaniulės išdėstymas, infuzijos tūris, infuzijos greitis ir stebėjimas realiuoju laiku{1}} visa tai daro įtaką tam, ar terapija pasiekia numatytą audinį ir pateikia aiškinamuosius veiksmingumo duomenis.

Biofarmacijos įmonėms,NHP modeliaiyra ypač vertingi, kai terapinis efektyvumas priklauso nuo primatų{0}}atitinkamos smegenų anatomijos ir nervų ryšio. Graužikų tyrimai gali paremti ankstyvą -sąvokos- įrodymą, tačiau jie negali visiškai atkurti primatų CNS objektų, tokių kaip putamen, talamus, juodoji medžiaga ir žievės projekcijų sistemos, masto ir struktūrinio sudėtingumo.

Prisys Biotech padeda pasauliniams rėmėjams paversti šiuos principus vykdomomis NHP ikiklinikinėmis programomis, įskaitant galimybių įvertinimą, stereotaktinį pristatymo planavimą, išilginį stebėjimą, mėginių paėmimo strategiją ir integruotą efektyvumo interpretavimą.

Norėdami aptarti, kaip mūsų NHP CNS genų terapijos ikiklinikinio vertinimo tarnyba gali palaikyti jūsų AAV arba biologinį vamzdyną, susisiekite su „Prisys Biotech“, kad gautumėte individualų tyrimo planavimo konsultaciją.

Susisiekite su Prisys Biotech

Nuorodos

• Salegio EA, Samaranch L, Kells AP, Forsayeth J, Bankiewicz KS. Vadovaujamas adeno-susijusių virusinių vektorių pristatymas į primatų smegenis. Išplėstinės vaistų pristatymo apžvalgos. 2012;64(7):598–604. DOI: 10.1016/j.addr.2011.10.005.
• Bobo R, Laske D, Akbasak A, Morrison P, Dedrick R, Oldfield E. Konvekcija{1}}sustiprintas makromolekulių patekimas į smegenis. PNAS. 1994;91:2076–2080. DOI: 10.1073/pnas.91.6.2076.
• Su X, Kells AP, Aguilar Salegio EA, Richardson RM, Hadaczek P, Beyer J, Bringas J, Pivirotto P, Forsayeth J, Bankiewicz KS. Realaus laiko MR vaizdavimas naudojant gadoteridolį numato transgenų pasiskirstymą po konvekcinio-patobulinto AAV2 vektorių pristatymo.​ Molekulinė terapija. 2010;18:1490–1495. DOI: 10.1038/mt.2010.114.
• Richardson RM, Kells AP, Martin AJ, Larson PS, Starr PA, Piferi PG, Bates G, Tansey L, Rosenbluth KH, Bringas JR, Berger MS, Bankiewicz KS. Nauja platforma, skirta MRT-valdomai konvekcijai-patobulintam terapiniam naudojimui: ikiklinikinis patvirtinimas nežmoginių primatų smegenyse. Stereotaksinė ir funkcinė neurochirurgija. 2011;89:141–151. DOI: 10.1159/000323544.